溶血性鏈球菌A群(GAS)熒光定量PCR試劑盒是一種常用于檢測(cè)和檢驗(yàn)基因的試劑盒,它通過(guò)PCR技術(shù),利用熒光信號(hào)來(lái)檢測(cè)靶序列的存在和數(shù)量。
溶血性鏈球菌A群(GAS)熒光定量PCR試劑盒具備以下幾個(gè)特點(diǎn):
1. 可以檢測(cè)非常小的DNA片段,也可以檢測(cè)微量的DNA,因此具有高靈敏度的特點(diǎn)。
2. 具有高擴(kuò)增效率,可以在短時(shí)間內(nèi)擴(kuò)增出大量的目標(biāo)DNA片段。
3. 可以精準(zhǔn)地分析和定量PCR反應(yīng)體系中的DNA。它的分辨率較高,能夠有效地區(qū)分靶序列和非靶序列,并且具有較低的誤差率。
4. 使用簡(jiǎn)單方便,只需簡(jiǎn)單設(shè)置PCR反應(yīng)條件即可,不需要使用復(fù)雜的設(shè)備和化學(xué)試劑。
5. 操作簡(jiǎn)單易學(xué),不需要復(fù)雜的實(shí)驗(yàn)步驟和技能。
【儲(chǔ)存條件及有效期】
-20℃±5℃,避光保存、運(yùn)輸、反復(fù)凍融少于 7 次,有效期 12 個(gè)月。
【適用儀器】
ABI 、安捷倫 MX3000P/3005P、LightCycler、Bio-Rad、eppendorf 等系列熒光定量 PCR 檢測(cè)儀?!?
1.1 DNA 提取
1) 對(duì)上述處理好的標(biāo)本加入等體積核酸提取液(固體標(biāo)本加入50μL 核酸提取液), 100℃恒溫處理 10min,13,000 rpm 離心 5min,取上清液轉(zhuǎn)移至新的 1.5mL EP 管,-20℃保存;
2) DNA 的提取也可以采用上海晅科生物科技有限公司生產(chǎn)的DNA 提取試劑盒(離心柱提取法),請(qǐng)嚴(yán)格按照試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作。
2. 檢測(cè)方法的局限性
a. 樣本檢測(cè)結(jié)果與樣本收集、處理、運(yùn)送以及保存質(zhì)量有關(guān);
b. 樣本提取過(guò)程中沒(méi)有控制好交叉污染,會(huì)出現(xiàn)假陽(yáng)性結(jié)果;
c. 陽(yáng)性對(duì)照、擴(kuò)增產(chǎn)物泄漏,會(huì)導(dǎo)致假陽(yáng)性結(jié)果;
d. 病原體在流行過(guò)程中基因突變、重組,會(huì)導(dǎo)致假陰性結(jié)果;
f. 試劑運(yùn)輸,保存不當(dāng)或試劑配制不準(zhǔn)確引起的試劑檢測(cè)效能下降,出現(xiàn)假陰性或定量檢測(cè)不準(zhǔn)確的結(jié)果;
g. 本檢測(cè)結(jié)果僅供參考,如須確診請(qǐng)結(jié)合臨床癥狀以及其他檢測(cè)手段。
1.1 結(jié)果判斷
陽(yáng)性:檢測(cè)通道 Ct 值≤35.0,且曲線有明顯的指數(shù)增長(zhǎng)曲線。
可疑:檢測(cè)通道 Ct 值>35.0,且出現(xiàn)典型擴(kuò)增曲線的樣本建議重復(fù)試驗(yàn),重復(fù)試驗(yàn)結(jié)果出現(xiàn) Ct 值≤35.0 和典型擴(kuò)增曲線者為陽(yáng)性,否則為陰性。
陰性:樣本檢測(cè)結(jié)果無(wú) Ct 值且無(wú)明顯的擴(kuò)增曲線。
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